400-606-0451
引物最好在模板 cDNA 的保守區(qū)內(nèi)設(shè)計(jì)，保守區(qū)是不同物種同一基因的相同序列DNA 序列。引物長度一般在15 ～ 30bp之間。引物長度常用的是18 ～ 27bp，過長會(huì)導(dǎo)致其延伸溫度大于74℃，不利于PCR反應(yīng)。
本著保密原則，測(cè)序樣本我們會(huì)為您保留一個(gè)月，所以如果想加測(cè)需要在一個(gè)月內(nèi)進(jìn)行，否則需要重新送樣。
導(dǎo)致該情況的因素較多，如同一物種，在不同的種族或個(gè)體之間，其基因序列可能會(huì)存在差異。另外，PCR過程中的錯(cuò)配也是因素之一。我們提供的結(jié)果是客戶樣品序列的真實(shí)結(jié)果，因此無法保證與參考序列完全一致，請(qǐng)理解。
PCR反應(yīng)過程中會(huì)出現(xiàn)錯(cuò)配現(xiàn)象，這些錯(cuò)配分布在PCR產(chǎn)物的不同位置，所以我們得到的PCR產(chǎn)物是許多攜帶不同位置錯(cuò)配片段的混合物。PCR產(chǎn)物直接進(jìn)行測(cè)序
一般情況下，如果序列較長，得到的測(cè)通序列都是拼接的結(jié)果，拼接的部分是第一個(gè)反應(yīng)的末端和第二個(gè)反應(yīng)的前端，這一部分往往會(huì)有雜帶，我們會(huì)以信號(hào)好的為主，信號(hào)弱的作為參考，但也不是絕對(duì)的。
基因組中通常存在一些不明原因的復(fù)雜結(jié)構(gòu)，如回文序列和發(fā)夾結(jié)構(gòu)等，這些結(jié)構(gòu)的存在會(huì)導(dǎo)致信號(hào)的突然減弱或中斷；另一種情況是DNA堿基排列并沒有異常，而是DNA整體出現(xiàn)復(fù)雜的結(jié)構(gòu)，這樣將導(dǎo)致測(cè)序根本無法進(jìn)行。
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